本文是学习GB-T 25172-2020 猪常温精液生产与保存技术规范. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们
本标准规定了猪常温精液生产与保存的基本要求和技术要求,描述了对应的试验方法,给出了保存
和运输的内容。
本标准适用于猪的常温精液生产与保存。
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 23238 种猪常温精液
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
原精液 raw semen
采集后未经稀释的精液。
3.2
常温精液 fresh semen
经稀释后在16℃~18℃下保存,仍具有受精能力的精液。
注:改写GB 23238—2009,定义3.2。
3.3
精子活力 sperm motility
在37 ℃下呈直线前进运动的精子占总精子数的百分率。
3.4
精子密度 sperm concentration
单位体积精液中的精子数。
3.5
精子畸形率 abnormal sperm percentage
畸形精子占总精子数的百分率。
应健康且达到种用要求。成年公猪宜每周采精二次至三次,青年公猪宜每周一次至二次。
GB/T 25172—2020
应经过专业培训,工作时应着洁净工作衣、帽,穿长胶鞋,戴无毒塑料手套。
应设置采精区和安全区。采精区设置假台猪,地面防滑,并保持清洁、安静和避光。
应设置精液检查、稀释和分装区,温度宜控制在22℃~25℃,避免太阳光直射或紫外灯照射。配
备仪器和用品参见附录 A。
4.5.1 配制用水应符合GB/T 6682 中二级水或三级水的要求。
4.5.2 商品稀释剂按说明书使用。不得使用过期或变质稀释剂。
4.5.3 自配稀释液所用试剂应为分析纯,稀释液配方参见附录 B。
4.5.4 稀释液 pH 值应为6.8~7.2。
4.5.5 使用前1 h
配制,配制后应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人。
4.5.6 稀释液应密封后置于冰箱中0℃~4℃冷藏,保存时间不应超过24 h。
5.1.1.1
集精杯或保温杯(内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸)、载玻片、盖玻片、精液
处理器皿应预热至37℃。
5.1.1.2
显微镜载物台恒温板应预热至37℃。精子密度仪使用前应预热。
5.1.2.1
应剪去公猪包皮部长毛,清洁体表,擦干水渍。
5.1.2.2
应挤净包皮积液,先用0.1%高锰酸钾溶液清洗腹部和包皮,再用温水清洗后擦干。
5.1.2.3
宜用设备采精法,按使用说明书操作。手握法采精时,应一只手戴双层无毒聚乙烯手套,按摩
公猪包皮部,待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎,脱去外层手套,握紧龟头,使其不能旋转,顺势将阴茎的
"S"状弯曲延直。另一只手持集精杯或保温杯,弃去最初射出的少量精液,收集精液至射精完毕。
5.1.2.4
采精完毕后,应标记公猪耳号,送至精液处理室。
外观、气味、采精量、精子活力、精子密度和精子畸形率。
应符合表1的规定,其中任何一项不符合要求的则废弃。
GB/T 25172—2020
表 1 原精液质量
|
|
|
|
---|---|---|---|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
5.2.3.1 采精量
采用称量法计算采精量,1 g 相当于1 mL。
5.2.3.2 精子活力
取中层精液10 μL~15μL,
在200倍~400倍显微镜下检查。每份精液取样二次,每个样观察三个
视野,计算平均值。使用自动分析仪器应按其检测方法操作。
5.2.3.3 精子密度
采用精子密度仪测定。应定期用血细胞计数板法校正。
5.2.3.4 精子畸形率
采用伊红或姬姆萨染色法检查时,在200倍~400倍显微镜下观察左、中、右三个视野中不少于200
个精子。也可采用相差显微镜直接观察。每二个月抽检一次。
5.3.1 精液采集后应尽快稀释,放置时间不宜超过15 min。
5.3.2
采用等温稀释。精液与稀释液温差不得超过1℃,根据精液温度调节稀释液温度,不得反向
操作。
5.3.3
将稀释液沿杯壁缓慢加入精液中,轻轻摇动或沿一个方向搅拌,混合均匀。高倍稀释时,先低倍
稀释(1:1)~(1:2),30 s 后再加入余下的稀释液。
5.3.4 稀释液总量以体积V 计,数值以毫升(mL) 表示,按式(1)计算:
式中:
style="width:2.57334in;height:0.59898in" />
……………………
(1)
i— 采精量,单位为毫升(mL);
c — 精子密度,单位为108 个每毫升(10°个/mL);
s — 每剂量中直线前进运动精子数,单位为10°个;
v₂— 剂量,单位为毫升(mL)。
5.3.5 精液稀释后应静置5 min, 按5.2.3.2检测精子活力,活力不得低于70%。
GB/T 25172—2020
5.4.1 剂量、每剂量中直线前进运动精子数应符合GB 23238 的规定。
5.4.2
可采用袋装或瓶装,应使用对精子无毒害作用且灭菌的一次性塑料或硅胶制品。
5.4.3 分装完毕,应排出空气后密封。
应及时将精液检验、精液稀释、精液分装的处理和结果填入精液质量检测登记表,登记表见附录C。
5.6.1 精液应置于22℃~25℃下1h~2h
后,平放入16℃~18℃恒温箱内避光保存;也可用12层~
15层纱布(或干毛巾)包严直接放入恒温箱内。
5.6.2 保存的精液每隔4 h~8h 摇动一次并记录,摇动时应轻缓均匀。
5.6.3
每批精液应留样备查。同批号的精液在有效期内应抽样检查并记录,常温精液保存登记表见附
录D。
5.6.4 常温精液产品质量和标志应符合GB 23238 的规定。
5.6.5
精液应置于16℃~18℃的恒温箱内避光运输,运输过程中避免强烈震动和碰撞。
GB/T 25172—2020
(资料性附录)
精液处理室配备仪器和用品
精液处理室配备仪器和用品见表 A.1。
表 A.1 精液处理室配备仪器和用品
|
|
|
---|---|---|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
200 g/0.01 g |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1000 mL±5 mL |
|
|
1000 mL |
|
|
5 L |
|
|
1000 mL、2000 mL |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
GB/T 25172—2020
表 A.1 ( 续 )
|
|
|
---|---|---|
|
|
|
|
0℃~60 ℃ |
|
|
|
|
|
|
GB/T 25172—2020
(资料性附录)
常见常温精液稀释液配方
常见常温精液稀释液配方见表B.1。
表 B.1 常见常温精液稀释液配方
|
|
|
|
|
---|---|---|---|---|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
||
|
|
|
||
|
|
|
||
|
|
|||
|
|
|||
|
00
(规范性附录)
精液质量检测登记表
精液质量检测登记表见表 C.1。
表 C.1 精液质量检测登记表
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
|
|||||||||||||||
style="width:3.10002in" />
(规范性附录)
常温精液保存登记表
常温精液保存登记表见表D.1。
表 D.1 常温精液保存登记表
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||
\<0
更多内容 可以 GB-T 25172-2020 猪常温精液生产与保存技术规范. 进一步学习